高压氧给脑出血大鼠脑中血管新生的作用及机制研究

第一章前言

近年来研究表明，脑出血患者在起病后一段时间内仍出现进行性中枢神经功能恶化，这提示除脑出血引起的急性脑组织损害外，还存在有血肿周边组织的继发性损害[13] [14]^在血肿周围存在一个组织损伤和水肿形成进行性加重的区域，此区域称血肿周边缺血半影区或半暗带。缺血半暗带包围着血肿区，缺血半暗带比血肿本身范围更大[16]，缺血区的形成一是因为血肿的机械性压迫，另一原因是血肿周围聚集的血管活性物质的影响，这些血管活性物质也在血肿外周水肿的发展方面起很重要的作用[17]。在缺血半暗带内部发生一系列动态过程，该区域内的病理改变在一定时间内是可逆性的，如果不积极处理，不抑制其发展，将造成不可逆的神经损害，脑细胞去极化波、细胞外液中兴奋性氨基酸增加、离子通道激活、即早基因如c-fos、c-jim等诱导、热休克蛋白表述等在脑组织的损伤都起重要的作用；缺血半影区的脑组织损伤过程也是时间依赖性的，在开始损伤阻止形成致死性损伤之前3?4个小时（这段时间称之为治疗时间窗）[19]，如果能在此时间窗内给予适当的治疗措施，缺血半影区有可能重建血液再灌，可使受损组织恢复功能。因此，探讨脑出血后一段时间内脑血肿周围组织半影区内潜在的继发性损伤及修复机制是目前临床和实验研究的热点。大量实验与临床研究证实，脑出血后几小时，甚至其后相当长一段时间内均可见血肿周围或血肿周边缺血半暗带出现局部脑血流下降（cerebral blood flow,CBF)减少，其所累及的范围远远大于出血区，甚至在血肿的远隔区域亦可见到范围广泛的局部脑血流下降，而且其局部脑血流的下降不随血肿清除而改善，由此导致脑组织大范围的继发性损害[21]。

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第二章材料与方法

2.1材料

动物实验氧船武汉七零一研究所氧业中心

医用氧气湖南莲湖医用氧气厂

数字测氧仪浙江建德市梅城电化分析仪器厂

石醋切片机北京弘泰嘉业科技发展有限公司

病理石蜡包埋机沈阳市龙首电子仪器有限公司

微波炉格兰仕集团

TL 2鼠脑立体定位仪Stoelting公司

微量进样器上海佳安分析仪器厂

电子分析天平上海方瑞仪器有限公司

恒温水浴箱北京长流科学仪器有限公司

电热恒温培养箱黄石市恒丰医疗器械有限公司

超低温冰箱SANYO公司

图像釆集与分析系统ChemiGenius公司

紫外分光光度计Quwell公司

大型水平电泳槽北京东林昌盛生物科技有限责任公司

双稳数显电泳仪北京东林昌盛生物科技有限责任公司

2.2方法

本研究应用120只清洁级Sprague-Dawley (SD)大鼠（250?300g，8?10周龄)，雌雄各半，由中南大学医学实验动物中心提供（许可证号：SCX (湘）2021?0003)。大鼠词养于中南大学医学实验动物中心专用饲养室，釆用架式笼养，光照12小时明暗交替，保持词养温度为20±rC,湿度50?60%。将健康清洁级SD大鼠随机分为假手术组(A组）（40只）和手术组（80只），其中手术组造模后又随机分为脑出血组（B组）、高压氧组（C组），每组40只。分别于术后4d、7d、14d、21d、28d随机抽取各组大鼠8只进行各项检测，每组5只进行免疫组化实验；每组3只进行焚光定量PCR实验。

第三章结果.........17

3.1模型制作评价...........17

3.2行为学观察与评定结果..........17

第四章讨论.........27

4.1脑出血SD大鼠动物模型制作...........27

4.2脑出血与血管新生............29

4.3高压氧对脑出血血管新生的影响..........30

第五章结论..............37

5高压氣在神经干细胞方面的应用

5.1高压氧医学的介绍

高压氧医学(Hyperbaric Oxygenation Medicine)是一门较为年轻的临床医学分支学科，是一门涉及多学科的边缘学科，其主要任务是运用基础医学和临床医学，以及关于基础理论，不断探索与掌握高压氧治疗的原理，研究并提出诊断及防治措施，并应用其作用机理，不断扩大和完善高压氧治疗的各种适应证，慎重掌握其禁忌证，即从基础研究和临床应用着手，促使高压氧医学迅速发展，为人类健康事业作出应有的贡献[2]。

5.2高压氧治疗神经系统疾病的机理

大量临床和实验研究证实HBO可提高脑组织的氧含量及氧储量，改善脑组织代谢，减少脑细胞因缺氧而变性坏死；提髙有氧代谢，减少无氧酵解，降低脑内乳酸盐浓度，从而纠正酸中毒，改善微循环；可收缩脑血管，减少脑组织的血流量，从而减轻脑水肿，保护血脑屏障，降低颅内压[24];可提高超氧化物歧化酶（SOD)的含量，加强清除自由基和抗氧化能力，双向调节NO的生成[25]，减少再灌注对脑组织的损伤；可恢复缺血半影区;功能，抑制神经细胞凋亡[26]，促进神经细胞的恢复与再生，增强损伤脑组织的可塑性[27]，提高的智力及记忆力水平，改善精神症状[28]。基于以上机理，高压氧治疗神经系统疾病显示了良好的疗效，具有十分广阔的应用前景。

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6结语

总之，虽然我们了解高压氧可激活神经干细胞的增殖和分化，从而改善神经系统疾病的症状与预后，但高压氧对神经干细胞增殖和分化的作用是多方面的，由于现在国内外关于高压氧与神经干细胞的研究及论文尚不是很多，高压氧与神经干细胞的作用机制目前仍是很不清楚。但我们相信，随着高压氧与神经干细胞的实验室与临床研究的深入，高压氧治疗在神经干细胞的应用方面将展现美好的前景。

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参考文献（略）