糖尿病冠心病中医各证型与ACE基因多态分布相关性研究

第一章立题依据

第一节糖尿病冠心病的祖国医学研究

糖尿病患者病久，由阴虚燥热转为气阴两虚，加之患者多形体肥胖，盛而气衰，水津不布，停为痰浊;气虚推动乏力，阴虚血脉涩滞，痰癖互结，痹阻心脉而见心前区憋闷、疼痛，舌质紫暗等临床特征。现代研究通过血小板功能测定、甲皱微循环及血流变学指标的测定，证实了因虚致癖、癖血内停的病机，但气阴两虚之病机还缺乏客观指标。屠伯言四等认为本病与体质因素、情绪紧张、过食肥甘之品关于，其病位以心脾肾为主，基本病机是心脾阳虚，日久痰癖交阻不化，阴虚火旺导致壮火食气，气衰血必癖，其中痰癖交阻尤为重要。魏执真131等人认为消渴病心病是因消渴病不及时治疗而致病情进一步发展，其病位在心，涉及肺、脾、胃、肝、肾等脏腑，病机是心气阴两虚，郁癖阻脉，或心脾两虚，痰气阻脉。进一步发展可致心气衰微，水饮停聚，甚或阴竭阳脱，阴阳离绝而致厥证。祝湛予1301认为本病属本虚标实之证，以气阴两伤、脾肾阳虚、心血亏损、阴阳两虚为本;癖血阻络痰浊不化，水湿泛滥为标。张润云13]等认为消心病(糖尿病性心脏病)多因饮食不节、劳逸失度、精神情志刺激诱发，病机在于¹气血不足º痰凝血癖»肝肾阴虚而致本虚标实之证，以心之气血不足、阴阳失调为本，血癖、痰浊为标。林兰Isll认为消渴病心病，在消渴病阴虚为本的基础上，兼痰浊、血癖、寒凝，而因虚致实，虚实夹杂。其中冠心病者偏于痰痪交阻，心肌病者偏于心气虚，自主神经病变偏于心阴虚，但心气虚与心阴虚兼夹血癖为糖尿病心脏病三者共同的病理基础。由上可见，中医对本病的病因病机认识趋于一致。

第二节摘尿病冠心病的现代医学研究

糖尿病冠心病与非糖尿病性冠心病患者病理改变基本相同，主要为冠状动脉粥样硬化、心肌微小血管病变，但均较非糖尿病患者严重。王瑞萍ls1等人回顾性总结了1984一1993年糖尿病和非糖尿病老人心脏的临床及尸检材料，结果表明:糖尿病组的冠状搪尿病冠心病中医各证型与ACE基因多态分布相关性研究动脉病变严重，累及支数多，心肌内小冠状动脉壁增厚明显;冠心病及心肌梗塞的患病率及心力衰竭的发生率均高于非糖尿病组;且糖尿病组冠心病的发病年龄较非糖尿病组早5年。姚群厘lvl通过对糖尿病患者心肌的超声组织特性测定发现糖尿病组的心肌整体灰阶水平高于对照组，同时左心室各节段灰阶水平高于对照组，证实糖尿病人存在弥漫性心肌纤维化;且糖尿病组心肌灰质离散度与对照组相比差异有显著性(P<0.05)，表明心肌间质和血管周围纤维化的不均匀分布。

遗传因素糖尿病是一个多基因一多因子的遗传性疾病，多个基因的微效累积作用和后天环境因素对糖尿病及糖尿病冠心病的发生起到了重要的影响。血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性ACE是RAS的关键酶，其水平受ACE基因调控，ACE可使血管紧张素H水平增加，进而使血管收缩、血管平滑肌及心肌细胞肥厚增生，从而引起冠状动脉狭窄、心肌供血不足，故其与糖尿病血管并发症有着密切的关系，相关的研究较多，但因种族及生存环境差异，报道结果不的研究证实ACE基因插入/缺失多态性是女性2型糖尿病患者合并冠心病的独立危险因素。李等人的研究也发现DD型及D等位基因频率，糖尿病冠心病组显著高于非糖尿病(P<0.01)。许氏1101的检测结果也表明携带D型等位基因的2型糖尿病患者有冠心病易感性。

第二章糖尿病冠心病中医不同证型与ACE基因多态分布相关性研究

第一节研究对象与方法

根据中医辨证，将糖尿病组病人分成四个亚组，其中阴虚热盛组，12例;气阴两虚组，20例;阴阳两虚组，16例;血痪气滞组，15例。在糖尿病组的阴虚热盛、气阴两虚、阴阳两虚和血癖气滞四个亚组中，ACE基因的基因型频率存在明显的差异(P<0.05)，但组间两两比较:阴虚热盛组与阴阳两虚组、血癖气滞组间存在明显的差异(P<0，05)，其余各组间无显著的差异(P>0.05)。血癖气滞组以n型居多，频率为53.3%，阴虚热盛组和气阴两虚组则均是ID型为多，频率分别为75.0%和70.0%，阴阳两虚组则是DD型和ID型均较高，n型最少，频率分别为37.5%、37.5%和25.0%。二个等位基因在各组间无明显的差异(P>0.05)，且阴虚热盛组和血癖气滞组均为I基因占优势，频率分别为542%和7%;阴阳两虚组则是D基因占优势，频率为56.3%:气阴两虚组则是I、D基因频率相同。

第二节主要研究指标的检测与方法

一、血样的采集每个病例用试管一支(分用2%EDI人抗凝)，并注明编号;取人外周血1毫升，用于ACE基因多态性的检测:注意防止凝血。ACE基因UD多态性检测(一)材料l、全血DNA提取试剂盒试剂盒组成二瓶生产厂家:宝生物工程大连有限公司(华运代理)标准PCR反应试剂盒试剂盒组。生产厂家:宝生物工程大连有限公司(华运代理)。

第三章探讨和展望6

1研究对象与方法6

3主要研究指标的检测与方法7

4资料与结果9

5讨论12

第三章探讨和展望

1研究对象与方法

本实验研究中检测了52名糖尿病冠心病患者、62名搪尿病患者、30名冠心病患者与41名正常对照者，发现三个病理组的基因型及等位基因频率，与正常对照组比较均存在显著的差异(P<0.05);各组的L产D等位基因均有着显著的差异(P<0.05)。提示ACE基因的多态性可能是糖尿病、冠心病及糖尿病冠心病发病的共同危险因素。目前的不少研究亦证实了这一点。临床和病理研究均证实糖尿病冠心病与单纯的糖尿病、冠心病相比，病情更为严重和复杂。本研究结果中正常对照组中，DD型较n型及D型为少，频率为14.6%，糖尿病组和冠心病组均是ID型最高，频率分别为52.4%和63.3%，而糖尿病冠心病组则以DD型为高，频率为42.3%;至于等位基因频率，在正常组和糖尿病组中以I等位基因占优势，频率分别为56.1%和53.2%，冠心病组和糖尿病冠心病组则是D等位基因占优势，频率为583%和62.5%。提示随着疾病复杂程度的不同，ACE基因的基因型呈现不同的优势，DD基因随着疾病的复杂程度呈现增长的趋势;提示D等位基因是糖尿病和冠心病发生的主要危险因素，而且在复合疾病中，D基因则呈现明显的优势。

结论

1、本课题以中医辨证论治为指导，与现代分子生物学技术相结合，以糖尿病冠心病这一临床疑难病症为着眼点，对中医临床辨治规律的研究开辟了一条新思路，但糖尿病冠心病是一多基因一一多因子的复杂病症，各等位基因间无显性隐性的区别，每个基因的效应亦十分微小，且受环境因素影响，故而欲对中医证与基因间的相关性进行有益且有效的探讨，仍须进一步完善设计，注意到环境因素对疾病的影响。

2、因受临床研究条件及时间所限，本研究中冠心病组病例较少，未能做出中医分型研究。

3、由于糖尿病冠心病、糖尿病、冠心病等均具有复杂的疾病的遗传特点，应用大样本集结临床组合分析，有可能得到更为详细的结果。

4、中医学对糖尿病冠心病的治疗，临床收效颇丰，尤其是辨证论治是中医药的治疗的特色与优势所在，辨证是施治和前提，只有正确的辨证，才能获得满意疗效。积极开展糖尿病冠心病的辨证实质研究，尤其是在分子基因水平探讨，其与相关基因多态性分布的研究，对于进一步提高中医药疗效，探寻中医药作用靶点，科学阐明中医疗效机理，将提供新的思路和方法，具有广阔的运用前景。

参考文献（略）